甲基綠是具有金屬光澤的綠色微結(jié)晶或亮綠色粉末,屬三苯甲烷類堿性染料,以兩種形式存在。Ⅰ式分子式C26H33Cl2N3。分子量458.49。綠色結(jié)晶,帶金黃光澤或淡綠色粉末。能溶于水,微溶于乙醇,不溶于醚。通常為氯化鋅的復(fù)鹽。Ⅱ式分子式C27H35BrClN3。分子量516.98。綠色粉末,能溶于水呈綠藍(lán)色。在pH0.2時(shí)溶液呈黃顏色,pH1.8時(shí)呈藍(lán)色。
甲基綠可用于測(cè)定維生素K3,對(duì)于維生素K3的測(cè)定主要有液相色譜法、熒光法及某些電化學(xué)分析法,迄今用分光光度法測(cè)定VK3的報(bào)道甚少。由于分光光度法有儀器價(jià)廉、操作簡便、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)在藥物分析中廣泛應(yīng)用。因此,進(jìn)一步研究和發(fā)展靈敏度高,簡便快速測(cè)定VK3的新分光光度法具有重要意義。
研究發(fā)現(xiàn),在pH為8.7~9.5的溶液中,當(dāng)維生素K3與堿性三苯甲烷染料甲基綠作用時(shí)能使甲基綠產(chǎn)生褪色反應(yīng),其褪色波長為630 nm,并在紫外區(qū)的213 nm和261 nm處出現(xiàn)兩個(gè)較弱的吸收峰,褪色反應(yīng)的表觀摩爾吸光系數(shù)ε630=2.13×105 L mo l-1 cm-1,其褪色程度(ΔA)與VK3濃度在0.11~2.40 mg/L的范圍呈正比,反應(yīng)具有很高的靈敏度,對(duì)于VK3的檢出限(3σ)為32.0μg/L。反應(yīng)也有良好的選擇性,用于針劑中維生素K3的測(cè)定,取得了滿意結(jié)果。本法不僅靈敏度高,而且簡便快速。